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      微生物檢測方法有哪些 微生物檢測步驟介紹

      316次 2025.03.12

        微生物涵蓋了有益跟有害的眾多種類,廣泛涉及食品、醫(yī)藥、工農(nóng)業(yè)、環(huán)保等諸多領(lǐng)域。有效地進行微生物檢測,確定微生物的含量,才能采取有效的措施,從而保障人們的身體健康不受微生物的危害。


      微生物檢測


        微生物檢測方法


        1、電子計數(shù)器計數(shù)法


        電子計數(shù)器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過一個細胞,當一個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成一個脈沖,自動記錄在電子記錄裝置上。


        該法測定結(jié)果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區(qū)分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。


        2、計數(shù)器測定法


        即用血細胞計數(shù)器進行計數(shù)。取一定體積的樣品細胞懸液置于血細胞計數(shù)器的計數(shù)室內(nèi),用顯微鏡觀察計數(shù)。


        由于計數(shù)室的容積是一定的(0.1mm3),因而根據(jù)計數(shù)器刻度內(nèi)的細菌數(shù),可計算樣品中的含菌數(shù)。本法簡便易行,可立即得出結(jié)果,不僅適于細菌計數(shù),也適用于酵母菌及霉菌孢子計數(shù)。


        3、比濁法


        比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細菌的數(shù)量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。


        此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數(shù)目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。


        4、測定細胞總氮量或總碳量


        氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩(wěn)定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質(zhì)量。此法適于濃度較高的微生物檢測。


        5、活細胞計數(shù)法


        常用的有平板菌落計數(shù)法,是根據(jù)每個活的細菌能長出一個菌落的原理設(shè)計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然后將定量的稀釋液進行平板培養(yǎng),根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù),可算出活菌數(shù)。


        此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌數(shù)的方法,也是目前國際上許多國家所采用的微生物檢測方法。使用該法應(yīng)注意:


       ?、僖话氵x取菌落數(shù)在30~300之間的平板進行計數(shù),過多或過少均不準確;;


       ?、跒榱朔乐咕渎樱绊懹嫈?shù),可在培養(yǎng)基中加入0.001%的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC);


       ?、郾痉ㄏ抻糜谛纬删涞奈⑸铩V泛應(yīng)用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是常用的微生物檢測方法。


        6、測定細胞重量法


        此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進行稱重;干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,以清水洗凈放入干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,是微生物檢測的一種常用方法。


        微生物檢測步驟


        一、接種


        將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過程叫做接種。


        二、分離純化


        含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物(mixedculture)。如果在一個菌落中所有細胞均來自于一個親代細胞,那么這個菌落稱為純培養(yǎng)(pureculture)。在進行菌種鑒定時,所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過程稱為分離純化,方法有許多種。


        三、培養(yǎng)


        1、根據(jù)培養(yǎng)時是否需要氧氣,可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩大類。


        2、根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài),可分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)兩大類。


        四、常規(guī)鑒定技術(shù)


        (一)形態(tài)結(jié)構(gòu)和培養(yǎng)特性觀察


        (二)生理生化試驗


        (三)化學成分分析


        五、微生物保存


        基本原理是在挑選優(yōu)良純培養(yǎng)物并使其處于休眠狀態(tài)基礎(chǔ)上,人為地創(chuàng)造一個有利于休眠的環(huán)境,使其長期保存后仍能保持菌種原有的優(yōu)良特性。基本措施是低溫、真空、干燥。


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